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Activités et Descriptif des prestations
ACTIVITES
La plate-forme offre plusieurs niveaux de prestations :
(1) Accès en libre service aux équipements
(2) Réalisation par la plate-forme de projets de cristallogenèse
(3) Projet de cristallographie en collaboration.
PRESTATIONS
(1) Libre accès aux équipements
Prestation PFx : formation à l’utilisation des robots de cristallisation et visualisation des cristaux, mise à disposition de tous les consommables nécessaires : kits de cristallisation prêts à l’emploi, plaques, films, …
(2) Réalisation par la plate-forme de projets de cristallogenèse : 3 prestations de service à partir de différents points d’entrée : plasmide recombinant ou protéine purifiée.
Indépendamment du point d’entrée de votre projet sur la plate-forme, une étude bioinformatique (analyse de séquence, prédiction de domaines, recherche de structure 3D de protéine homologue, …) et un contrôle qualité (dosage, SDS-PAGE, DLS, CD, autre…) de votre protéine, seront réalisés.
A - Préparation de l’échantillon
La première étape d’un projet d’étude structurale d’une protéine est sa production dans un système d’expression approprié et sa purification à plus de 95% de pureté.
Prestation PFx : expression de votre protéine en système bactérien et purification dans le but de réaliser un screening de cristallogenèse.
A partir de votre plasmide recombinant, nous contrôlons l’expression en système bactérien ainsi que la faisabilité de purification par chromatographie (affinité + gel filtration). La production sera ensuite réalisée en grand volume mais limitée à la quantité nécessaire pour les expériences de cristallogenèse.
B - Screening initial de cristallogenèse
L’identification d’une ou plusieurs conditions de cristallisation est la première étape pour l’obtention de cristaux de haute qualité.
Prestation PFx : contrôle qualité de l’échantillon et tests de cristallisation avec des solutions de cristallisation commerciales ou « maison « (dans la limite de 10 plaques 96 puits, soit 960 conditions différentes).
C – Optimisation des cristaux
La taille et qualité des cristaux sont des éléments importants pour leur pouvoir de diffraction. Il est donc souvent nécessaire d’optimiser les premières conditions de cristallisation par l’addition d’additifs, la modification des concentrations en précipitant, sel, du pH…
Prestation PFx : optimisation de vos cristaux dans la limite de 10 plaques 24 puits.
(3) Projet de cristallographie en collaboration
Collaboration entre l’utilisateur, la plate-forme et une équipe de recherche de cristallographes : la collaboration peut être initiée par la prestation de service en cristallogenèse (2).
TARIFS : consulter le site de l’UMS 3444
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